紫外可见分光光度计线性动态范围,真的很重要!

　　紫外可见分光光度计是一种很重要的分析仪器,在使用一台新的紫外可见分光光度计仪器前,一般需要先对仪器的线性度进行测试。但大多数使用者只是在某一试样的某一浓度附近,用浓度的倍数变化来测出这一段的线性度。这只能反映仪器在小范围内的使用情况,并不能说明仪器的线性度是否符合出厂指标,也不能反映仪器的线性范围。因此,在仪器使用前对其线性度的测试有着重要的意义！

　　如果仪器使用在非线性区，肯定会因非线性而产生误差。为了保证分析测试结果的可靠性，应使用在仪藉的线性区。使用者总是希望对很稀的样品分析时，其分析测试的结果在所要求的误差范围内。

　　对很浓的样品分析时，其分析测试的结果也在所要求的误差范围内；这就只有仪器的线性动态范围很宽的时候才能做到。有人认为样品可以进行浓缩或稀释处理，但这样不仅增加工作量、操作烦琐，还会带来误差。所以我们总是希望分光光度计的线性动态范围大者好。

　　线性动态范围的定义是：zui大线性区（保证相对误差的线性区域）的吸光度值Amax， 除以zui小线性区（保证1%相对误差的线性区域）的吸光度值Amin。即LDR=Amax/Amin ；或zui大线性区（保证1%相对误差的线性区域）的浓度Crnax除以zui小线性区（保证1%相对误差的线性区域）的浓度cmin，即：LDR=Cmax/Cmin。

　　紫外可见分光光度计的线性动态范围取决于仪器的杂散光和噪声。因为，杂散光是仪器分析测试误差的主要来源，它限制被分析测试样品浓度的上限。

　　另外噪声也是光度计误差的主要来源之一。它限制被分析样品浓度的下限。许多高档紫外可见分光光度计都给出仪器的光度噪声，高档的仪器光度噪声可达±O．0002。所以高精度的紫外可见分光光度计线性动态范围很宽（或能分析的样品的浓度很低时，还可保证在误差范围内）。有的噪声大多在±o．002左右。因此线性动态范围就较窄（能保证1%相对误差时的浓度下限较大，或下限浓度较高）。

　　杂散光的影响要比噪声小，并且杂散光影响的是高浓度时的分析误差，而噪声是影响低浓度时的分析误差；所以不管是仪器的设计还是使用都应该注意到这一点。

　　测试方法

　　分光光度计线性度测试的方法很多,常用的方法大致有[4]:

　　(1)溶液稀释法:将重铬酸钾稀释到不同浓度,测量不同波长处的吸光度(一般需测85个吸光度值),然后根据此数据作曲线,判断线性度。

　　(2)中性滤波片法:一般以3块中性滤波片叠加,比较测定值与计算值之差来判断线性度。

　　(3)百分法:使被测试样浓度成倍增加,测其吸光度并作曲线,判断实验值偏离比尔定律直线部分的程度。

　　(4)改变池厚法:用不同厚度的样品池来测量重铬酸钾的吸光度,以此观察光度计的线性度。

　　(5)旋转扇形板法:将不同透射率的扇形板置于样品光束中旋转,测出各点透射率并与真值进行比较。

　　(6)光叠加法:利用双孔规来分段测量,然后用曲线判断线性度。

　　综上所述，紫外可见分光光度计的线性动态范围非常重要，它将限制仪器的使用范围（即限制仪器的适用性）。因此不管制造者还是使用者，都必须对仪器的线性动态范围引起高度重视，才能提高仪器的水平。才能提高使用者的分析测试技术水平。